|YMBioTM PEI pro+转染试剂
【产品详情】
可用于哺乳类动物及昆虫等细胞转染实验
3003必赢贵宾会PEI pro+转染试剂采用阳离子聚合物线性聚乙烯亚胺为主要作用成分，以与 DNA 形成稳定复合物，具有高效转染能力，不影响细胞活性，操作方便快捷。
适用于多种细胞类型，有效转染哺乳动物和昆虫等细胞，包括Hela、CHO-K1、HEK-293/293T、NIH/3T3、COS-1/7、HepG2和Sf9等贴壁细胞和悬浮细胞，甚至一些难以转染的细胞系。也可应用于大规模重组蛋白表达和病毒生产。
【性能优势】
【转染操作流程】
下面以6孔板为例，其他培养容器按培养容器的底面积按比例增减（一个孔以转染3微克质粒，核酸(μg)：转染试剂(μL)=1：3）。
1. 细胞铺板
转染实验前一天，将适量细胞接种到6孔板中培养。
2. 转染复合物的制备
（1） 将核酸加入到150μl的Opti-MEM或无血清DMEM中稀释，充分混匀，制备形成核酸稀释液。
（2） 将YMBioTM PEI pro+转染试剂加入到步骤(1)的混合液中，充分混匀，制备形成转染试剂+核酸稀释液，于室温下静置5 min。
3. 转染（滴加转染复合物）
（1） 将上述转染复合物加入到2 mL的细胞和培养基(可含血清和抗生素)上，前后轻轻晃动混匀。
注意：本产品采用含血清的全培养基有助于提升转染效率；培养基中可加入抗生素。
（2） 放置37℃，5％CO2培养箱中培养。
（3） 培养24-72小时得到结果。
不同细胞培养容器转染推荐用量
下表中各种用量转染时可根据情况进行优化，优化比例建议DNA/转染试剂=1:1~1:5
细胞培养容器 | 表面积 cm² | 核酸用量 μg | Opti-MEM量 μL | PEI pro+用量 μL | 培养基总量 plate/well |
| 96-well | 0.3 cm² | 0.1 μg | 10 μL | 0.3 μL | 0.2 mL |
| 24-well | 1.9 cm² | 0.5 μg | 25 μL | 1.5 μL | 1 mL |
| 12-well | 3.8 cm² | 1 μg | 50 μL | 3 μL | 1 mL |
| 6-well / 35-mm | 10 cm² | 3 μg | 120 μL | 9 μL | 2 mL |
60 mm / flask 25 cm² | 21 cm² | 6 μg | 400 μL | 18 μL | 5 mL |
100 mm / flask 75 cm² | 55 cm² | 12 μg | 600 μL | 36 μL | 10 mL |
【注意事项】
1. 本转染试剂在转染过程中可以添加抗生素，抗生素的添加与否不影响转染效率和毒性。
2. 本试剂用于DNA转染时细胞密度一般为75%-80%。同时也可根据不同细胞的生长条件以及密度对转染起始时的细胞密度进行调整。
3. 优化的必要性。由于核酸和转染试剂的用量比值是决定转染效率的重要因素，初次应用时，建议先进行优化。最优条件确定后，实验的结果将非常稳定。初次应用时，建议核酸(μg)和转染试剂(μL)的比例在1:2与1:5之间进行优化。
4. 对转染的DNA的要求：建议转染的DNA采用超纯水溶解，采用纯水溶解会更好与转染试剂作用从而提高转染效率。
【运输与保存】
试剂盒于2-8℃冷链运输，在-20°C 下可稳定保存至少18个月；建议根据常规用量分装后-20°C保存。
